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miRNA實(shí)驗(yàn)解決方案（操作手冊(cè)）---第一章：miRNA簡(jiǎn)介
發(fā)布時(shí)間： 2025-01-07 點(diǎn)擊次數(shù)： 577次一、miRNA的合成途徑
在動(dòng)物細(xì)胞核中，miRNA基因的初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物Pri-miRNA（長(zhǎng)度大約為300～1000 nt）被RNase IIl-Drosha 酶切割成為發(fā)夾結(jié)構(gòu)前體 miRNA（Pre-miRNA，長(zhǎng)度大約為70～100nt）。經(jīng)過初步剪切后，Pre-miRNA在轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Exportin-5的作用下由細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中，然后由另一種RNase Ill-Dicer 酶進(jìn)一步切割產(chǎn)生成熟的miRNA（長(zhǎng)度大約為21～23 nt）。成熟的miRNA與類似RISC的核糖體蛋白結(jié)合形成miRNA-RISC復(fù)合體，從而引起靶mRNA降解或者翻譯抑制。miRNA參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡、免疫調(diào)節(jié)以及物質(zhì)代謝等過程。
植物miRNA的形成過程全部是在細(xì)胞核中完成的，不存在Pre-miRNA從細(xì)胞核到細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。首先，細(xì)胞核中編碼miRNA的基因在RNA聚合酶II的作用下轉(zhuǎn)錄形成Pri-miRNA，然后在Dicer酶-DCL1的作用下形成Pre-miRNA，DCL1繼續(xù)作用于Pre-miRNA從而形成成熟的miRNA，以上過程均在細(xì)胞核中完成。成熟的miRNA或者是在細(xì)胞核中與類似RISC的核糖體蛋白結(jié)合形成miRNA-RISC復(fù)合體，然后被核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白HST運(yùn)送到細(xì)胞質(zhì)中，或者是先被HST運(yùn)送到細(xì)胞質(zhì)中，再與核糖體蛋白結(jié)合形成miRNA-RISC復(fù)合體。miRNA影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育、激素的調(diào)節(jié)、信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)、植物病害和應(yīng)答環(huán)境脅迫。
二、miRNA的特性miRNA最典型的特性就是兩點(diǎn)--保守性和特異性。
·保守性
miRNA的結(jié)構(gòu)和序列在物種之間幾乎保持不變。
結(jié)構(gòu)的保守性：無論動(dòng)物體還是植物體，miRNA的生成途徑都是由莖環(huán)結(jié)構(gòu)的前體切割成為成熟體；
序列的保守性：miRNA的序列在不同物種中的差距極小。
·特異性
miRNA的表達(dá)分布具有時(shí)間區(qū)別和空間區(qū)別。
時(shí)間的特異性：在個(gè)體不同的發(fā)育階段，miRNA的表達(dá)量不同；
空間的特異性：在個(gè)體的不同組織中，miRNA的表達(dá)量不同。
三、miRNA序列查找常用的查找miRNA數(shù)據(jù)庫--miRBase和TarBase。
該數(shù)據(jù)庫提供已發(fā)表的miRNA序列，注釋查詢，定位，發(fā)卡序列以及命名服務(wù)等信息的數(shù)據(jù)庫。
該數(shù)據(jù)庫人工搜集了實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證過的miRNA的靶基因，包括在人、小鼠、果蠅、蠕蟲和斑馬魚中的miRNA的靶基因。
四、miRNA產(chǎn)品選擇指南Vazyme 為您提供miRNA專用的提取、逆轉(zhuǎn)錄、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)以及SmallRNA建庫系列產(chǎn)品，并搭配最適miRNA引物設(shè)計(jì)軟件，可直接進(jìn)行成熟miRNA的實(shí)時(shí)熒光定量PCR高效檢測(cè)，及Small RNA的文庫構(gòu)建。
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深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O(shè)在廣東，服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。
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